Luận văn Nghiên cứu sự hấp thụ thuốc diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ gluconacetobacter xylinus trong môi trường nước dừa già

Nội dung tài liệu: Luận văn Nghiên cứu sự hấp thụ thuốc diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ gluconacetobacter xylinus trong môi trường nước dừa già

1. TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH - KTNN NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU SỰ HẤP THỤ THUỐC DICLOFENAC NATRI CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC DỪA GIÀ KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý người và động vật Hà Nội, năm 2019
2. TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH - KTNN NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU SỰ HẤP THỤ THUỐC DICLOFENAC NATRI CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC DỪA GIÀ KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý người và động vật Người hướng dẫn khoa học ThS Phạm Thị Kim Dung Hà Nội, năm 2019
3. LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành, sâu sắc tới cô: ThS Phạm Thị Kim Dung Là người đã tận tình hướng dẫn, cung cấp cho tôi những kiến thức quý giá giúp tôi từng bước nâng cao nhận thức để hoàn thành nội dung khóa luận. Tôi xin chân thành cảm ơn Viện nghiên cứu khoa Sinh đã tạo điều kiện trang thiết bị cho tôi hoàn thành khóa luận, bên cạnh đó tôi cũng xin chân thành cảm ơn Phòng Đào tạo và các thầy cô trong Khoa Sinh – KTNN đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian nghiên cứu. Tôi cũng không thể không gửi lời cảm ơn đến các cộng sự, những người cùng trong nhóm làm khóa luận sát cánh nghiên cứu và thảo luận khắc phục những sự cố và khó khăn. Tôi cũng xin cảm ơn gia đình, bạn bè những người tin yêu đã động viên tôi cố gắng trong suốt thời gian qua. Khóa luận tốt nghiệp này cũng là mốc đánh dấu những ngày chập chững tôi nghiên cứu khoa học, vì vậy không thể tránh khỏi thiếu sót và hạn chế. Tôi mong sẽ nhận được những sự góp ý quý báu từ thầy cô, bạn bè để tôi có những hành trang cho quá trình nghiên cứu sau này. Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 5 năm 2019 Sinh viên thực hiện Nguyễn Phương Thảo
4. LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan mọi nội dung trong khóa luận: “Nghiên cứu sự hấp thụ thuốc Diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ Gluconacetobacter xylinus trong môi trường nước dừa già” hoàn toàn là công trình nghiên cứu của tôi, dựa trên sự kế thừa và phát triển của các công trình nghiên cứu liên quan. Tôi xin cam đoan những số liệu mà tôi thống kê là do xây dựng thực nghiệm không trùng lặp với bất kì kết quả của nghiên cứu nào. Trong đề tài của tôi có sử dụng những thông tin từ các tài liệu tham khảo khác. Tôi xin phép trích dẫn và ghi nguồn gốc rõ ràng. Tôi xin chịu trách nhiệm với nội dung đề tài của mình. Hà Nội, ngày 20 tháng 5 năm 2019 Sinh viên thực hiện Nguyễn Phương Thảo
5. DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT KÍ HIỆU VIẾT TẮT NỘI DUNG 1 G. xylinus Gluconacetobacter xylinus 2 VLC Vật liệu cellulose 3 OD Mật độ quang phổ 4 MTD Môi trường nước dừa già
6. MỤC LỤC MỞ ĐẦU ................................................................................................................ 8 1. Lí do chọn đề tài ............................................................................................. 8 2. Mục đích của nghiên cứu ............................................................................... 9 3. Nội dung nghiên cứu ...................................................................................... 9 4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn ........................................................................ 9 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .............................................................. 11 1.1. GIỚI THIỆU TỔNG QUAN VỀ ĐỐI TƯỢNG, LĨNH VỰC NGHIÊN CỨU ................................................................................................................. 11 1.1.1. Tổng quan về Diclofenac natri ........................................................... 11 1.1.2. Tổng quan về Gluconacetobacter xylinus .......................................... 13 1.1.3. Tổng quan về Vật liệu cellulose (VLC) ............................................. 14 1.2. TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC .......................................................................................................................... 18 1.2.1. Trên thế giới ....................................................................................... 18 1.2.2. Tại Việt Nam ...................................................................................... 19 CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .... 20 2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .................................................................. 20 2.1.1. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................ 20 2.1.2. Thiết bị nghiên cứu ............................................................................ 20 2.1.3. Môi trường nghiên cứu ...................................................................... 21 2.2. PHẠM VI NGHIÊN CỨU, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN ....................... 22 2.2.1. Phạm vi nghiên cứu ............................................................................ 22 2.2.2. Địa điểm nghiên cứu .......................................................................... 22 2.2.3. Thời gian nghiên cứu ......................................................................... 22 2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................................................. 22 2.3.1. Tạo màng VLC lên men từ môi trường nước dừa già........................ 22 2.3.2. Xử lý VLC .......................................................................................... 23
7. 2.3.3. Đánh giá độ tinh khiết của màng VLC .............................................. 24 2.3.4. Phương pháp dựng đường chuẩn của thuốc Diclofenac natri trong dung dịch methanol ...................................................................................... 24 2.3.5. Xác định lượng thuốc được hấp thụ qua màng VLC ......................... 26 2.3.6. Phương pháp xử lý thống kê .............................................................. 29 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ....................................................... 30 3.1. Tạo vật liệu VLC từ G. xylinus trong môi trường nước dừa già ............... 30 3.1.1. Thu màng VLC được lên men trong môi trường nước dừa già ......... 30 3.1.2. Đo bề dày của các loại vật liệu VLC.................................................. 31 3.1.3. Kết quả trình xử lý VLC trước khi hấp thụ Diclofenac natri ............. 32 3.2. Kết quả sự hấp thụ thuốc Diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ Gluconacetobacter xylinus trong môi trường nước dừa già ............................ 33 CHƯƠNG 4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ....................................................... 38 4.1. Kết luận ..................................................................................................... 38 4.2. Kiến nghị ................................................................................................... 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO .................................................................................... 39
8. DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1. Thành phần dinh dưỡng môi trường nước dừa già [10] ...................... 21 Bảng 2.2. Môi trường dừa lên men tạo vật liệu VLC ........................................... 23 Bảng 2.3. Giá trị mật độ quang (OD) của dung dịch Diclofenac ở các nồng độ (mg/ml) khác nhau (n=3) ..................................................................................... 25 Bảng 3.1. Giá trị OD hấp thụ thuốc của màng VLC (n=3) .................................. 34 Mật độ quang OD (Abs 283nm) ........................................................................... 34 Bảng 3.2. Lượng thuốc hấp thụ vào màng VLC (mht) và tỉ lệ hấp thụ thuốc (EE%) với độ dày màng khác nhau tại thời điểm 2 giờ ....................................... 35
9. DANH MỤC HÌNH Hình 1.1. Công thức cấu tạo của Diclofenac natri ............................................... 11 Hình 1.2. Hình thái Gluconacetobacter xylinus ................................................... 13 Hình 2.1. Phương trình đường chuẩn của Diclofenac natri tại λ =283nm ........... 26 Hình 2.2. Chuẩn bị dung dịch thuốc Diclofenac natri cần hấp thu ...................... 27 Hình 2.3. Bình chứa màng chuẩn bị hấp thụ thuốc .............................................. 27 Hình 2.4. Màng VLC đang hấp thụ ...................................................................... 28 Hình 3.1. Hình ảnh màng VLC được lên men từ môi trường nước dừa già ........ 30 Hình 3.2. Màng VLC thu được có độ dày 0,5cm và 1cm .................................... 31 Hình 3.3. Màng VLC có độ dày 0,5cm (a) và màng VLC có độ dày 1cm (b) ..... 32 Hình 3.4. Màng VLC sau khi được xử lí bởi NaOH ............................................ 32 Hình 3.5. Màng VLC tinh khiết có d = 1 cm ....................................................... 33 Hình 3.6. Màng VLC sau khi ép 50% nước ......................................................... 33 Hình 3.7. Khối lượng thuốc hấp thụ trong cùng độ dày màng ............................ 35 Hình 3.8. Tỉ lệ thuốc hấp thụ trong các độ dày màng khác nhau ......................... 36
10. MỞ ĐẦU 1. Lí do chọn đề tài Hiện nay, trong xu thế hội nhập, kinh tế phát triển, con người có của ăn của để, thì cũng là lúc người ta quan tâm nhiều đến sức khỏe. Công nghệ sinh học cũng đang được đầu tư đẩy mạnh bởi những thành tựu của nó trong các ngành công nghiệp thực phẩm, y học Việc nghiên cứu làm tăng khả năng sử dụng của các loại thuốc phục vụ nâng cao sức khỏe của con người đang là hướng đi có nhiều triển vọng. Dựa trên cơ sở đó, tôi quyết định nghiên cứu một dạng thuốc chống viêm có ứng dụng lớn là Diclofenac natri nhằm làm tăng cường những ưu điểm và giảm thiểu những nhược điểm mà thuốc mang lại cho người sử dụng. Diclofenac natri là một dẫn xuất của Diclofenac, là một loại thuốc giảm đau trong thời gian ngắn, công dụng nhanh và mạnh. Chế phẩm thuốc không chứa steroid, đặc biệt công dụng đối với các bệnh về xương khớp. Cơ chế tác dụng của Diclofenac là làm ngăn cản sự tổng hợp của prostagladin (chất gây viêm, đau và sốt). Bên cạnh đó, thuốc cũng có tác dụng làm giảm nhiễm trùng sau phẫu thuật, làm giảm đau do vận động hay làm giảm đau bụng kinh [1,10]. Do Diclofenac natri có tác dụng ngắn và tức thì nên cần phải dùng nhắc lại nhiều lần, vì vậy thuốc ảnh hưởng tương đối đến đường tiêu hóa. Thuốc chống chỉ định với những người viêm loét dạ dày, hành tá tràng. Việc thuốc ngăn cản sự tổng hợp prostaladin cũng gây viêm cầu thận, hội chứng thận hư, hoại tử nhú đặc biệt đối với những có tiền sử suy tim và các bênh về thận [1,12]. Việc tôi lựa chọn nghiên cứu thuốc Diclofenac natri nhằm mong muốn kéo dài tác dụng của thuốc. Sự hấp thụ của thuốc được tôi lựa chọn nghiên cứu trên một loại vật liệu mang tính khả thi cao là vật liệu cellulose tạo ra từ G. xylinus. Gluconacetobacter xylinus là vi khuẩn thuộc nhóm Gram âm, sống kị khí bắt buộc dưới hình thức hóa dưỡng. Khi nuôi cấy chủng vi khuẩn này trong môi trường dịch lỏng, chúng hình thành nên một lớp màng VLC [2]. Màng VLC này mang nhiều đặc tính ưu việt của một chất mang như: Có khả năng hút tốt nhờ cấu trúc mạng lưới cellulose, có khả năng đàn hồi tốt, dễ dàng tương thích với các thiết bị sinh học, có tính bền, có khả năng tái sử dụng lại nhiều lần [3]. 8