Luận văn Nghiên cứu khả năng hấp thụ thuốc diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ gluconacetobacter xylinus nuôi cấy trong môi trường chuẩn

Nội dung tài liệu: Luận văn Nghiên cứu khả năng hấp thụ thuốc diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ gluconacetobacter xylinus nuôi cấy trong môi trường chuẩn

1. TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH – KTNN NGUYỄN TÚ HƢƠNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC DICLOFENAC NATRI CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MÔI TRƢỜNG CHUẨN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời và động vật Hà Nội, 20 tháng 5 năm 2019
2. TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH – KTNN NGUYỄN TÚ HƢƠNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC DICLOFENAC NATRI CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MÔI TRƢỜNG CHUẨN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời và động vật Ngƣời hƣớng dẫn: ThS. HÀ THỊ MINH TÂM Hà Nội, 20 tháng 05 năm 2019
3. LỜI CẢM ƠN Lời đầu, cho phép em bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc nhất tới Ban Giám hiệu Trƣờng ĐHSP Hà Nội 2; các quý thầy, cô trong khoa Sinh-KTNN; các quý thầy, cô ở Viện Nghiên cứu khoa học và ứng dụng Trƣờng ĐHSP Hà Nội 2 đã giúp đỡ em hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp. Em xin gửi lời biết ơn chân thành nhất tới ThS. Hà Thị Minh Tâm. Vì đây là lần đầu tiên đi vào làm nghiên cứu khoa học nên bƣớc đầu còn nhiều bỡ ngỡ và thiếu sót cả về mặt kiến thức cũng nhƣ kỹ năng, tuy nhiên đƣợc sự chỉ bảo tận tình của cô nên em đã hoàn thành tốt khóa luận của mình. Không có sự thành công nào mà không gắn liền với sự hỗ trợ, vì vậy em rất mong nhận đƣợc sự góp ý từ quý thầy, cô và các bạn sinh viên để khóa luận tốt nghiệp của em hoàn chỉnh hơn nữa. Em xin chân thành cám ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Tú Hƣơng
4. LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan khóa luận “Nghiên cứu về khả năng hấp thụ thuốc Diclofenac natri của vật liệu cellulose tạo ra từ gluconacetobacter xylinus nuôi cấy trong môi trƣờng chuẩn” là đề tài nghiên cứu của em dƣới sự hƣớng dẫn tận tình của Ths.Hà Thị Minh Tâm. Các kết quả, số liệu có đƣợc là do quá trình nghiên cứu của bản thân em, không có sự trùng lặp của bất cứ đề tài nào. Em xin chịu trách nghiệm về lời cam đoan của bản thân nếu có sai sót! Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Tú Hƣơng
5. DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BC : Cellulose vi khuẩn cs : Cộng sự MTC : Môi trƣờng chuẩn PC : Plant cellulose OD : Optical density VLC : Vật liệu cellulose G. xylinus : Gluconacetobacter xylinus
6. MỤC LỤC MỞ ĐẦU ................................................................................................................... 1 NỘI DUNG ............................................................................................................... 3 CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN ..................................................................................... 3 1.1. Giới thiệu tổng quan đối tƣợng và lĩnh vực nghiên cứu .................................... 3 1.1.1. Giới thiệu về Diclofenac ................................................................................. 3 1.1.2. Tổng quan về Bacterial cellulose .................................................................... 4 1.1.3. Đặc điểm phân loại của Gluconacetobacter xylinum ..................................... 5 1.2. Trình bày tổng quan tình hình nghiên cứu trong và ngoài nƣớc ........................ 6 1.2.1. Trên thế giới .................................................................................................... 6 1.2.2. Ở Việt Nam ...................................................................................................... 6 CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG, PHẠM VI, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........... 7 2.1. Đối tƣợng nghiên cứu ......................................................................................... 7 2.2. Phạm vi nghiên cứu ............................................................................................ 7 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu .................................................................................... 7 2.3.1. Vật liệu nghiên cứu ......................................................................................... 7 2.3.2. Phương pháp chế tạo vật liệu BC ................................................................... 9 2.3.3. Phương pháp xử lý thống kê ......................................................................... 13 CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .......................................................... 14 3.1. Kết quả tạo các loại vật liệu BC ....................................................................... 14 3.1.1. Tạo màng BC từ các môi trường lên men ..................................................... 14 3.1.2. Thu màng BC thô .......................................................................................... 14 3.1.3. Xử lý màng BC trước khi hấp thụ ................................................................. 15 3.1.4. Đánh giá độ tinh khiết của màng BC ............................................................ 15 3.1.5. Xây dựng phương trình đường chuẩn của thuốc Diclofenac ........................ 17 3.1.6. Khảo sát khả năng hấp thụ màng BC ........................................................... 17 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ................................................................................. 23 TÀI LIỆU THAM KHẢO
7. DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1. Hóa chất sử dụng trong nghiên cứu ......................................................... 7 Bảng 2.2. Các thiết bị sử dụng trong nghiên cứu ...................................................... 8 Bảng 2.3. Thành phần thuốc và khối lượng tương ứng ............................................. 9 Bảng 3.1. Giá trị OD hấp thụ thuốc của màng BC (n=3) (OD – 283 nm) .............. 19 Bảng 3.2. Lượng thuốc hấp thụ vào các màng BC tại thời điểm 2 giờ.................... 20 Bảng 3.3. Hiệu suất hấp thụ thuốc các loại màng BC trong 2 giờ .......................... 21
8. DANH MỤC HÌNH Hình 1.1. Công thức cấu tạo của thuốc Diclofenac .................................................. 3 Hình 3.1. Màng BC đang hình thành ...................................................................... 14 Hình 3.2. Rửa màng dưới vòi nước .......................................................................... 15 Hình 3.3. Màng BC tinh chế ..................................................................................... 16 Hình 3.4. Màng BC được chia vào các bình tam giác ............................................. 16 Hình 3.5. Phương trình đường chuẩn của diclofenac.............................................. 17 Hình 3.6. Chuẩn bị dịch đo quang phổ .................................................................... 18 Hình 3.7. Lượng thuốc hấp thụ vào các màng BC có sự khác biệt.......................... 20 Hình 3.8. Hiệu suất hấp thụ thuốc của các loại màng BC ....................................... 21
9. MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Diclofenac đƣợc biết là loại thuốc chống viêm không steroid. Thuốc Diclofenac có tác dụng hạ sốt, giảm đau và chống viêm, do nó ức chế hoạt tính của cyclogenase. Vì vậy, giảm sự tạo thành prostanglandin, prostacyclin và thromboxane là những chất trung gian trong quá trình viêm. Ngoài ra, Diclofenac điều hòa con đƣờng lipoxygenase và sự kết tụ tiểu cầu. Diclofenac còn gây hại cho đƣờng tiêu hóa do làm giảm khả năng tổng hợp Prostaglandin gây ức chế tạo mucin (là chất bảo vệ cho đƣờng tiêu hóa). Prostaglandin là chất có vai trò duy trì tƣới máu thận. Các thuốc chống viêm không steroid ức chế tổng hợp Prostaglandin gây viêm cầu thận, hội chứng thận hƣ và hoại tử nhú đặc biệt biểu hiện rõ ở những ngƣời bệnh thận, ngƣời suy tim. Với những ngƣời bệnh trên, các thuốc chống viên không steroid gây suy thận cấp và suy tim cấp.[5] Trong tự nhiên xuất hiện một số vi khuẩn sinh màng cellulose. Nuôi cấy các vi khuẩn này trong môi trƣờng chứa glucose, glycerol hoặc một số nguồn cacbon hữu cơ khác nhau thì chúng có hình thành trên bề mặt một lớp màng cellulose sinh học thuần khiết, hay còn gọi là màng sinh học Bacterial cellulose (BC). BC cấu tạo bởi các sợi microfibril tạo thành những bó sợi song song hình thành mạng cellulose có độ bền cơ học, đô tinh khiết và thấm hút cao. BC là sản phẩm trao đổi chất sơ cấp, tạo màng bảo vệ. BC là nguồn polymer mới, giải pháp giúp cho nhiều nhà khoa học tìm ra nhiều nguồn nguyên liệu mới hiện nay, ứng dụng cho nhiều lĩnh vực khác nhau.[5] Với mục đích đánh giá đƣợc khả năng hấp thu thuốc Ranitidin của vật liệu BC và khảo sát các đặc tính lý hóa của vật liệu BC trƣớc và sau khi hấp thụ thuốc, chúng tôi thực hiện đề tài “Nghiên cứu khả năng hấp thụ thuốc Diclofenac natri của vật liệu Cellulose tạo ra từ Gluconacetobacter xilinus nuôi cấy trong môi trƣờng chuẩn”. 1
10. 2. Mục đích của nghiên cứu - Mục đích nghiên cứu: Thiết kế đƣợc hệ thống màng BC lên men từ môi trƣờng chuẩn đƣợc nạp thuốc diclofenac natri. Nghiên cứu khả năng hấp thụ thuốc tạo màng BC hấp thụ thuốc nhiều nhất. - Nhiệm vụ nghiên cứu: Chế tạo ra vật liệu BC, xử lý vật liệu BC trƣớc khi hấp thụ thuốc diclofenac natri, xác định lƣợng BC tạo thành, đánh giá độ tinh khiết vật liệu BC. Khảo sát tối ƣu hóa khả năng hấp thụ thuốc diclofenac natri vào vật liệu BC. Khảo sát đặc tính thuốc diclofenac natri trƣớc và sau khi đƣợc hấp thụ thuốc. 3. Nội dung nghiên cứu Nghiên cứu khả năng hấp thụ thuốc Diclofenac natri của vật liệu Cellulose tạo ra từ Gluconacetobacter xilinus nuôi cấy trong môi trƣờng chuẩn. 4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn - Ý nghĩa khoa học: Xây dựng đƣợc quy trình tạo màng BC lên men trong môi trƣờng chuẩn. - Ý nghĩa thực tiễn: Từ kết quả nghiên cứu chọn ra đƣợc trƣờng hợp hấp thụ thuốc tốt nhất. Từ kết quả nghiên cứu trên có thể áp dụng vào thực tiễn đời sống. 5. Tính mới của đề tài - Nâng cao khả năng hấp thụ thuốc diclofenac natri trong điều trị giảm đau, chống viêm. - Khắc phục nhƣợc điểm của thuốc từ chính kết quả nghiên cứu áp dụng vào điều trị bệnh. 2